Estudio La coloración con mieloperoxidasa mejora el diagnóstico de enfermedades de la sangre
January 9, 2026
La tinción de mieloperoxidasa (MPO), también conocida como tinción de peroxidasa leucocitaria (POX), es un método de tinción citoquímica ampliamente utilizado. Empleada principalmente para teñir células de la médula ósea y frotis sanguíneos, esta técnica detecta la actividad de la peroxidasa intracelular para ayudar en el diagnóstico de trastornos hematológicos, particularmente en la clasificación de leucemias.
La tinción MPO se basa en la reacción catalítica de la peroxidasa intracelular. Esta enzima descompone los óxidos para producir oxígeno, que luego reacciona con el yoduro de potasio para formar yodo. El yodo se combina con el colorante Wright-Giemsa, creando gránulos coloreados en el citoplasma que revelan la distribución de la peroxidasa bajo el microscopio. Diferentes tipos de células exhiben diferentes contenidos de peroxidasa y patrones de distribución, lo que permite que la tinción MPO las distinga.
La tinción MPO estándar requiere kits de reactivos especializados para garantizar la precisión y la fiabilidad. Un kit típico contiene:
- Solución A: Solución de eosina - Un colorante ácido que tiñe el citoplasma de rojo o rosa
- Solución B: Azul de Azure II - Un colorante básico que tiñe los núcleos de azul o púrpura
- Solución C: Tampón PBS de yoduro de potasio - Contiene el sustrato de reacción de peroxidasa y mantiene la estabilidad del pH
- Solución D: Tinción de Wright-Giemsa - Un colorante de doble propósito que mejora la morfología celular
Los kits están disponibles en varios tamaños (configuraciones de 5 pruebas, 20 pruebas y 100 pruebas) para adaptarse a las diferentes necesidades del laboratorio.
- Preparación de la solución de trabajo: Mezclar la Solución C con la Solución D (típicamente una proporción de 1,0 ml:250 µl). Usar dentro de las dos horas.
- Fijación del frotis: Fijar los frotis de médula ósea o sangre preparados con metanol o etanol durante 5-10 minutos.
- Tinción: Sumergir los frotis fijados en la solución de trabajo durante 5-10 minutos, controlando la temperatura y la humedad.
- Enjuague: Lavar suavemente con agua destilada o tampón PBS para eliminar el exceso de tinción.
- Contratinción (opcional): Usar hematoxilina para mejorar el contraste nuclear.
- Secado: Secar al aire o usar un secador de pelo.
- Microscopía: Examinar los frotis teñidos para evaluar la actividad y distribución de la peroxidasa.
La interpretación de los resultados requiere experiencia especializada. Los hallazgos comunes incluyen:
- Reacción positiva: Gránulos citoplasmáticos de color marrón rojizo a azul oscuro (positividad débil vs. fuerte). Los gránulos pueden cubrir todo el citoplasma u oscurecer el núcleo.
- Reacción negativa: Citoplasma azul sin gránulos y núcleos uniformemente de color púrpura rojizo.
- Eosinófilos: Exhiben una tinción azul oscuro intensa, a veces con cristales extracelulares en forma de aguja.
- Clasificación de leucemia: Distingue la leucemia mieloide (MPO-positiva) de la linfoide (MPO-negativa), guiando las decisiones de tratamiento.
- Diagnóstico de leucemia mieloide aguda (LMA): Confirma el origen mieloide y ayuda a la subtipificación, con diferentes tasas de positividad que indican diferentes subtipos de LMA.
- Evaluación del síndrome mielodisplásico (SMD): Evalúa la maduración y diferenciación celular, con patrones MPO anormales que sugieren SMD.
- Otros trastornos hematológicos: Útil en el diagnóstico de leucemia mieloide crónica y mielofibrosis.
- Calidad de los reactivos y condiciones de almacenamiento
- Adherencia estricta al protocolo
- Preparación adecuada del frotis
- Duración óptima de la tinción
- Evaluación microscópica experta por patólogos
Los avances tecnológicos continúan mejorando la tinción MPO. La inmunohistoquímica ahora combina MPO con marcadores inmunes para una mayor precisión, mientras que la citometría de flujo permite la detección cuantitativa de MPO. A medida que este método citoquímico clásico evoluciona, promete ofrecer aún mayores contribuciones al diagnóstico y tratamiento hematológico.